凋亡DNA Ladder提取试剂盒
描述:
凋亡(apoptosis)或程序化死亡的细胞,染色质DNA断裂形成长度约为n x 180bp (n=1,2,3,4…) 的DNA 片段,经琼脂糖凝胶电泳显示为阶梯状凋亡DNA Ladder,是凋亡细胞无可争辩的特征。本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder,原理涉及到快速裂解细胞,灭活核酸酶,酶学消化蛋白质和RNA,选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder。反应可在微量离心管进行,3小时完成,快速方便;无需有机抽提,检测灵敏度极高。
可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5-10 x 105个,但投入的细胞量可在1x 105 ~ 5x 106之间变化,其中应含有至少约1-2 x104个凋亡细胞。如果总细胞中有2 x104个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差,取材的量和部位难以掌握,这些因素会明显影响结果。但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder(参见说明4)。
补充说明:
目前,国内和国外大多数提取凋亡DNA的试剂盒仅仅是提提取细胞总DNA,包括基因组DNA和凋亡DNA。在随后进行DNA凝胶电泳检测何照相时,高丰度的基因组DNA呈现很强的荧光背景,通称会掩盖微弱的凋亡DNA Ladder荧光。这种试剂盒成本较低价格便宜,但灵敏度也很低。如果凋亡细胞数量不足或者凋亡程度不足,这类试剂盒通称无法给出清晰的凋亡DNA Ladder从而导致实验失败,浪费宝贵的实验材料及大量人力物力,实属得不偿失。
为避免上述问题,我们的调亡DNA Ladder提取试剂盒(#C1102)选择性地提取凋亡DNA,去除基因组DNA,很少量的凋亡DNA也可以在凝胶中清晰地显现出来, 因而具有很高的灵敏度。其灵敏度实际上只受限于溴化乙啶-DNA染色灵敏度。只要确实有少量细胞发生凋亡即可检测到凋亡DNA ladder。
大部分客户都能成功,使用我们的试剂盒的有些是完全没有经验的客户,均认为效果很好。还有一些过去从未检测成功的客户,用此试剂盒也检测出清晰的凋亡DNA Ladder。
以下仅仅列举数篇使用本kit的SCI研究论文:
Fu JJ, and Huang HQ, et al. European Journal of Pharmacology. 2007, 568:213-221
普利莱基因HiGene转染试剂,新型超低细胞毒性转染效率优于国外产品,欢迎索取试用装。
HiGene 转染试剂 (#C1506)
普利莱基因:www.applygen.com.cn
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